pAL2-T вектор предназначен для быстрого клонирования продуктов ПЦР без предварительной обработки рестриктазами или экзонуклеазами. Вектор представляет собой линеаризованн...
pAL2-T вектор предназначен для быстрого клонирования продуктов ПЦР без предварительной обработки рестриктазами или экзонуклеазами. Вектор представляет собой линеаризованную плазмиду с выступающими фосфорилированными 3’- концевыми тимидинами. Эффективное лигирование ПЦР-продукта в pAL2-T вектор основано на способности Таq-полимеразы и ее аналогов нематрично добавлять на 3’-конец синтезированной цепи ДНК дезоксиаденозин. Таким образом, продукт ПЦР и pAL2-T вектор несут выступающие комплементарные 3’-концевые нуклеотиды А:Т. Наличие таких «липких» концов обеспечивает значительно более высокую эффективность лигирования по сравнению с лигированием «втупую».
Фасовка содержит лиофилизированный вектор, который необходимо растворить в 25 мкл деионизированной воды (до концентрации 50 нг/мкл). Этого количества достаточно для постановки 25 стандартных реакций лигирования объёмом 10 мкл.
Основные свойства pAL2-T вектора:
• В 10 раз более высокая эффективность клонирования по сравнению с pAL-TA вектором;
• Клонирование продуктов ПЦР в вектор не требует предварительной ферментативной обработки;
• Вектор обеспечивает возможность бело-голубой селекции клонов (по результатам ПЦР-скрининга не менее 90% белых колоний содержат рекомбинантную плазмидную ДНК);
• Вектор можно использовать для клонирования как индивидуальных ампликонов, так и сложных смесей (например, амплифицированных библиотек кДНК);
• Возможен отбор рекомбинантных клонов путем ПЦР-скрининга бактериальных колоний с использованием стандартной пары праймеров;
• Растворённый в воде pAL2-T вектор выдерживает не менее 10-15 циклов размораживания/замораживания без снижения эффективности клонирования.
Хранение: -20°C
Транспортировка: комнатная температура (не более недели) либо -20°C
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки - 1 год.
Вектор для экспрессии NirFP в клетках млекопитающих под контролем CMV-промотора, содержит полилинкер (MCS) на 5'- конце кодирующей последовательности NirFP....
Вектор для экспрессии NirFP в клетках млекопитающих под контролем CMV-промотора, содержит полилинкер (MCS) на 5'- конце кодирующей последовательности NirFP.