Nikon

Системы наблюдения за ростом клеток с поддержанием гомогенной температурной и газовой среды, которые применяются для кинетических исследований клеточных процессов. Предназначены как для работ в научно-исследовательской области (исследование процессов апоптоза), так и в медицине (фагоцитоз, влияние лекарственных веществ на живые клетки и эмбрионы).

 

Характеристики:

Объем инкубатора, 460 л;

3 ряда по 10 уровней загрузки образцов;

Число емкостей, устанавливаемых на один уровень:

Культуральные флаконы: 2×25 см2 или 1×75 см2;

Чашки Петри, 5×35 мм, 2×60 мм, 1×100 мм;

Планшет, 1×96.

Специальный блок загрузки/выгрузки образцов для снижения колебаний инкубационных параметров;

Контроль температуры, от +5 °С выше комнатной до +40 °С, ±0,1;

Пластинные нагреватели встроены с шести сторон инкубационного блока для прямого и быстрого нагрева;

Контроль влажности, 70-95 % ±1 %;

Инжекторная система увлажнения;

Контроль уровня СО2, 0-20 %, с допустимой погрешностью 0,1 %;

Постоянная регистрация изменений параметров внутренней и сохранение записей в виде отдельного файла;

Встроенный инвертированный микроскоп с увеличением 2x, 4x, 10x, 20x и 40x;

Планполуапохроматические фазово-контрастные объективы Nikon, снижающие гало-эффект и обеспечивающие получение четких изображений;

«Холодное» диодное освещение для снижения нагрева образцов;

Методы исследований: фазовый контраст (высоко-интенсивное красное освещение, автоматическая смена фазовых колец), эпи-флуоресценция (опционально);

Охлаждаемая CCD камера (1 Мпикс, 15 кадров/сек);

Вес, 470 кг.

Описанные в данном разделе цифровые камеры разработаны специально для использования с микроскопами и позволяют документировать изображения, которые в последующем могут быть обработаны с использованием специальных программ. Камеры со средним разрешение (до 3 Мп) оптимальны для документирования начального уровня при наблюдениях по методу СП, ТП, ФК и ДИК. Цветные камеры высокого разрешения (от 5 Мп) идеально подходят для документирования морфологических и гистологических препаратов, в областях, где важны детали и хорошая цветопередача. Монохромные камеры с функцией охлаждения рекомендуется использовать при наблюдениях по методу флуоресценции. Высокоскоростные камеры (от 20 к/сек) предназначены для съемки быстротекущих процессов. Цифровые камеры устанавливаются в дополнительный видеовыход на тубусе микроскопа.

Высокоточная охлаждаемая цветная головка фотокамеры;матрица CCD (ПЗС) — 2/3" цветная; 5 Мп ( 2560×1290); разрядность — 12-бит;режим живого отображения, частота кадров — 1280×960 пикселей (макс. 7.2 кадр./сек); 640×480 пикселей (макс. 11.5 кадр./сек); режим ROI (макс. 22 кадр./сек);размер изображения для записи — макс. 2560×1920 (1280×960, 640×480) пикселей;для работы в СП, ФК, ДИК;механизм охлаждения Пельтье, снижающий тепло-индуцированные шум, для захвата флуоресцентных изображений;поддержание температуры экрана −20°С ниже температуры окружающего воздуха;фильтр уменьшения ИК-излучения от галогеновой лампы;чувствительность — ISO 64;экспозиция, сек — от 1/1000 до 60 сек;размеры, мм — 77×76×44;вес, г — 290.

Крепление к микроскопу через C-Mount адаптер. В комплект поставки входит камера, кабель (3 м).

Аксессуары и опции:

ПО ACT-U3 или NIS-Elements;блок DS-U3 блок управления камерами серии DS для подключения к ПК через USB (в комплект поставки входит и ПО NIS-Elements F);блок DS-L2 автономный многофункциональный блок управления камерами серии DS со встроенным цветным LCD-монитором 8,4″; не требует подключения к ПК; сохранение данных на флэш-карте и/или передача по компьютерной сети.

Описанные в данном разделе цифровые камеры разработаны специально для использования с микроскопами и позволяют документировать изображения, которые в последующем могут быть обработаны с использованием специальных программ. Камеры со средним разрешение (до 3 Мп) оптимальны для документирования начального уровня при наблюдениях по методу СП, ТП, ФК и ДИК. Цветные камеры высокого разрешения (от 5 Мп) идеально подходят для документирования морфологических и гистологических препаратов, в областях, где важны детали и хорошая цветопередача. Монохромные камеры с функцией охлаждения рекомендуется использовать при наблюдениях по методу флуоресценции. Высокоскоростные камеры (от 20 к/сек) предназначены для съемки быстротекущих процессов. Цифровые камеры устанавливаются в дополнительный видеовыход на тубусе микроскопа.

Ультравысокого разрешения охлаждаемая цветная головка фотокамеры, 12,7 Мп (4076×3116);матрица CCD (ПЗС) — 2/3" цветная; общее количество пикселей: 1,5 Мп (из них эффективных 1,45 Мп); разрядность — 12-бит;режим живого отображения, частота кадров — 1280×1024 пикселей (макс. 19 кадр./сек); 645×512 пикселей (макс. 19 кадр./сек); 320×256 пикселей (макс. 19 кадр./сек); режим ROI (макс. 28 кадр./сек);размер изображения для записи — макс. 4076×3116 (3840×3072, 1920×1536) пикселей;для работы с использованием методов ФЛ, ТП, ФК;механизм охлаждения Пелтье снижает тепло-индуцированные шум, позволяя захватить даже слабые сигналы флуоресценции;поддержание температуры экрана −10°С ниже температуры окружающего воздуха;формирование рисунка высокой четкости 12,7-мегапиксельной матрицей CCD, 2200 TV линий высокой четкости;плавная демонстрация живого изображения с макс. частотой кадров 32 кадр/сек;чувствительность — ISO 200;экспозиция, сек — от 1/1000 до 60 сек;размеры, мм — 77×76×44;вес, г — 350.

Крепление к микроскопу через C-Mount адаптер. В комплект поставки входит камера, кабель (3 м).

Аксессуары и опции:

ПО ACT-U3 или NIS-Elements;блок DS-U3 блок управления камерами серии DS для подключения к ПК через USB (в комплект поставки входит и ПО NIS-Elements F);блок DS-L2 автономный многофункциональный блок управления камерами серии DS со встроенным цветным LCD-монитором 8,4″; не требует подключения к ПК; сохранение данных на флэш-карте и/или передача по компьютерной сети.

Серия моторизированных высокоскоростных мультифункциональных инвертированных микроскопов, способных интегрироваться в любые системы для различных методов исследования (СП, ТП, ДИК, ФК, флуоресценция, рельефный контраст, TIRF- флуоресценция полного внутреннего отражения, конфокальная микроскопия, FRET-резонансный перенос энергии флуоресценции, фотоактивация, микроинъекции и т.д). Модульная структура позволяет быстро изменять систему и расширяет функции исследования.

Высокая скорость моторизированного контроля и захвата изображения;оптическая система — CFI60, настроенная на бесконечность;тубус — бинокулярный, бинокулярный эргономичный;окуляры с диоптрийной подстройкой — CFI 10х/22, 12,5х/16, 15х/14,5;осветитель — галогеновый 100 Вт, 30 Вт;револьвер объективов — 6-ти местный;объективы CFI60 — 4x, 10x, 20x, 40х, 60х, 100х Oil;предметный столик — моторизированные столики с датчиками положения и перемещением по осям X-Y; 400×300 мм; фиксированные, прикрепляемые механические и др.;кнопочная панель управления спереди и с боков микроскопа;информативный цифровой дисплей на корпусе микроскопа;возможность управления с удаленных блоков управления, с компьютера, джойстиком;система лучшей фокусировки автоматически корректирует дрейф фокуса при добавлении реагентов и длительных наблюдениях;возможность исследований в фазовом контрасте с NA-объективами без использования дополнительного фазирующего кольца (уже встроено в корпус микроскопа);новая серия широкопольных объективов CFI S Plan Fluor ELWD и для фазового контраста CFI S Plan Fluor ELWD 20х/ 40х/ 60х, CFI Plan Apochromat 20x;ПО NIS-Elements обеспечивает быстрый, точный и доступный контроль одновременно для всего оборудования, входящего в систему (микроскоп, камеры, периферия и др. компоненты);встраиваемые осветители;осветитель моторизированного лазера TIRF специально разработан для Ti-E и Ti-U; угол наклона лазера можно легко запомнить и с помощью контрольной панели возобновить; это устройство переключается с записи мультиволновых изображений TIRF на изображения флуоресценции.

Модификация Ti-E.

Полностью моторизированная модель для автоматического контроля (фокусирования, переключения портов, грубой фокусировки) и дополнения различным оборудованием. Возможность заказа модели с нижним портом.

Базовая модель;моторизированные столик и револьвер;4 порта, моторизированное переключение портов;механизм грубой рефокусировки;фокусировка путем вертикального перемещения моторизированного револьвера объективов;моторизированный (шаговый двигатель);возможность переключения между грубой/ средней/ точной фокусировкой;регулировка интенсивности излучения, выключение осветителя, VPD на передней части корпуса, управление с помощью пульта контроллера;потребляемая мощность (в полной комплектации с HUB-A и периферийными устройствами), Вт — 95;вес (максимальный, с комплектом для флуоресценции), кг — 45,4.

Аксессуары и опции для Eclipse Ti:

;инкубационная система (поддерживает 37°С, 90% влажность и 5% СО2);термостатируемый предметный столик;аксессуары и объективы для ФК, рельефного контраста, флуоресценции;фильтры;адаптеры для подключения систем видеодокументирования.

Все микроскопы Nikon комплектуются нашими специалистами по Вашему запросу.

Серия моторизированных высокоскоростных мультифункциональных инвертированных микроскопов, способных интегрироваться в любые системы для различных методов исследования (СП, ТП, ДИК, ФК, флуоресценция, рельефный контраст, TIRF- флуоресценция полного внутреннего отражения, конфокальная микроскопия, FRET-резонансный перенос энергии флуоресценции, фотоактивация, микроинъекции и т.д). Модульная структура позволяет быстро изменять систему и расширяет функции исследования.

Высокая скорость моторизированного контроля и захвата изображения;оптическая система — CFI60, настроенная на бесконечность;тубус — бинокулярный, бинокулярный эргономичный;окуляры с диоптрийной подстройкой — CFI 10х/22, 12,5х/16, 15х/14,5;осветитель — галогеновый 100 Вт, 30 Вт;револьвер объективов — 6-ти местный;объективы CFI60 — 4x, 10x, 20x, 40х, 60х, 100х Oil;предметный столик — моторизированные столики с датчиками положения и перемещением по осям X-Y; 400×300 мм; фиксированные, прикрепляемые механические и др.;кнопочная панель управления спереди и с боков микроскопа;информативный цифровой дисплей на корпусе микроскопа;возможность управления с удаленных блоков управления, с компьютера, джойстиком;система лучшей фокусировки автоматически корректирует дрейф фокуса при добавлении реагентов и длительных наблюдениях;возможность исследований в фазовом контрасте с NA-объективами без использования дополнительного фазирующего кольца (уже встроено в корпус микроскопа);новая серия широкопольных объективов CFI S Plan Fluor ELWD и для фазового контраста CFI S Plan Fluor ELWD 20х/ 40х/ 60х, CFI Plan Apochromat 20x;ПО NIS-Elements обеспечивает быстрый, точный и доступный контроль одновременно для всего оборудования, входящего в систему (микроскоп, камеры, периферия и др. компоненты);встраиваемые осветители;осветитель моторизированного лазера TIRF специально разработан для Ti-E и Ti-U; угол наклона лазера можно легко запомнить и с помощью контрольной панели возобновить; это устройство переключается с записи мультиволновых изображений TIRF на изображения флуоресценции.

Модификация Ti-S.

Базовая модель;моторизированные столик и револьвер;2 порта с ручным переключением;фокусировка путем ручного вертикального перемещения револьвера объективов;потребляемая мощность (в полной комплектации с HUB-A и периферийными устройствами), Вт — 40;вес (максимальный, с комплектом для флуоресценции), кг — 33,4.

Аксессуары и опции для Eclipse Ti:

;инкубационная система (поддерживает 37°С, 90% влажность и 5% СО2);термостатируемый предметный столик;аксессуары и объективы для ФК, рельефного контраста, флуоресценции;фильтры;адаптеры для подключения систем видеодокументирования.

Все микроскопы Nikon комплектуются нашими специалистами по Вашему запросу.

Серия моторизированных высокоскоростных мультифункциональных инвертированных микроскопов, способных интегрироваться в любые системы для различных методов исследования (СП, ТП, ДИК, ФК, флуоресценция, рельефный контраст, TIRF- флуоресценция полного внутреннего отражения, конфокальная микроскопия, FRET-резонансный перенос энергии флуоресценции, фотоактивация, микроинъекции и т.д). Модульная структура позволяет быстро изменять систему и расширяет функции исследования.

Высокая скорость моторизированного контроля и захвата изображения;оптическая система — CFI60, настроенная на бесконечность;тубус — бинокулярный, бинокулярный эргономичный;окуляры с диоптрийной подстройкой — CFI 10х/22, 12,5х/16, 15х/14,5;осветитель — галогеновый 100 Вт, 30 Вт;револьвер объективов — 6-ти местный;объективы CFI60 — 4x, 10x, 20x, 40х, 60х, 100х Oil;предметный столик — моторизированные столики с датчиками положения и перемещением по осям X-Y; 400×300 мм; фиксированные, прикрепляемые механические и др.;кнопочная панель управления спереди и с боков микроскопа;информативный цифровой дисплей на корпусе микроскопа;возможность управления с удаленных блоков управления, с компьютера, джойстиком;система лучшей фокусировки автоматически корректирует дрейф фокуса при добавлении реагентов и длительных наблюдениях;возможность исследований в фазовом контрасте с NA-объективами без использования дополнительного фазирующего кольца (уже встроено в корпус микроскопа);новая серия широкопольных объективов CFI S Plan Fluor ELWD и для фазового контраста CFI S Plan Fluor ELWD 20х/ 40х/ 60х, CFI Plan Apochromat 20x;ПО NIS-Elements обеспечивает быстрый, точный и доступный контроль одновременно для всего оборудования, входящего в систему (микроскоп, камеры, периферия и др. компоненты);встраиваемые осветители;осветитель моторизированного лазера TIRF специально разработан для Ti-E и Ti-U; угол наклона лазера можно легко запомнить и с помощью контрольной панели возобновить; это устройство переключается с записи мультиволновых изображений TIRF на изображения флуоресценции.

Модификация Ti-U.

Универсальная модель с возможностью использования различных лазерных осветителей и моторизированных компонентов. Возможность заказа модели с нижним портом.

Базовая модель;моторизированные столик и револьвер;4 порта с ручным переключением;механизм грубой рефокусировки;фокусировка путем ручного вертикального перемещения револьвера объективов;потребляемая мощность (в полной комплектации с HUB-A и периферийными устройствами), Вт — 40;вес (максимальный, с комплектом для флуоресценции), кг — 42,3.

Аксессуары и опции для Eclipse Ti:

;инкубационная система (поддерживает 37°С, 90% влажность и 5% СО2);термостатируемый предметный столик;аксессуары и объективы для ФК, рельефного контраста, флуоресценции;фильтры;адаптеры для подключения систем видеодокументирования.

Все микроскопы Nikon комплектуются нашими специалистами по Вашему запросу.

A1R MP — это система получения мультифотонных изображений, оснащенная гальванометрическим сканером высокого разрешения и высокоскоростным резонансным сканером, которые позволяют регистрировать изображения со скоростью от 30 кадров в секунду при разрешении 512×512 пикселей до 420 кадров в секунду в режиме полосового сканирования.

Четырехканальные приемники, не требующие десканирования, с более высокой чувствительностью, пониженным темновым током и широким спектральным диапазоном позволяют в реальном времени разделять отклик от близко расположенных зондов для получения точных и высококонтрастных спектральных изображений.

Резонансный сканер позволяет регистрировать изображения со скоростью до 420 кадров в секунду;высокоскоростное формирование изображений глубоких слоев живых образцов с помощью не требующего десканирования NDD-детектора с высокой чувствительностью;высокоскоростное и высокоточное разделение за счет использования 4-канального NDD-детектора;юстировка мультифотонного лазерного луча одним нажатием кнопки.

Развитие генной инженерии, протеомики, биотехнологии, современной фармацевтики и биомедицины способствовало быстрому внедрению новых методов конфокальной микроскопии, и в настоящее время они широко используются в клеточной биологии.

Конфокальную флуоресцентную микроскопию можно рассматривать как разновидность традиционной флуоресцентной микроскопии, которая позволяет исследовать внутреннюю микроструктуру клеток, причем не только фиксированных, но и живых, идентифицировать микроорганизмы, структуры клетки и отдельные молекулы, наблюдать динамические процессы в клетках. Конфокальная флуоресцентная микроскопия в дополнение к этому обеспечила возможность трехмерного субмикронного разрешения объекта и существенно расширила возможность неразрушающего анализа прозрачных образцов. Повышение разрешающей способности достигается благодаря использованию в конфокальных микроскопах лазеров в качестве источников света и конфокальной диафрагмы для фильтрации внефокусной флуоресценции. Преимущество лазеров по сравнению с ртутными или ксеноновыми лампами заключается в монохроматичности и высокой параллельности испускаемого пучка света. Эти свойства лазерного излучения обеспечивают более эффективную работу оптической системы микроскопа, уменьшают число бликов, улучшают точность фокусировки пучка света. На образце лазер освещает не все поле зрения, как в ламповом флуоресцентном микроскопе, а фокусируется в точку. Конечно, при этом лазерный луч возбуждает флуоресценцию как в точке фокуса, так и во всех слоях образца, через которые проходит. И если эта внефокусная флуоресценция, излучаемая слоями, расположенными выше и ниже фокальной плоскости, регистрируется вместе с основным сигналом из фокуса объектива, это ухудшает разрешение оптической системы. Избавиться от внефокусной флуоресценции позволяет конфокальная диафрагма. Изменяя диаметр конфокальной диафрагмы, можно определять толщину оптического слоя вблизи фокуса лазерного луча, поэтому флуоресценция, испускаемая выше и ниже фокуса, оказывается дефокусированной на конфокальной диафрагме и не регистрируется. Благодаря этому конфокальная микроскопия обеспечивает улучшенное разрешение, в первую очередь вдоль оси Z.

Современная конфокальная микроскопия позволяет решать три основные задачи: изучение тонкой структуры клетки, колоколизации (пространственного взаиморасположения) в клетке двух или более веществ, а так же исследование динамических процессов, протекающих в живых клетках.

Благодаря улучшенному разрешению, особенно повышенному разрешению по оси Z, и возможности создавать серии «оптических» срезов, конфокальный микроскоп позволяет исследовать тонкую структуру объекта в трехмерном пространстве. Специальные программы позволяют создать из серии оптических срезов объемное изображение объекта (3D) и как бы рассматривать его под разными углами зрения, что может дать ценную информацию о форме клеток, цитоскелете, структуре ядра, хромосомах и даже локализации в них отдельных генов, а так же о взаиморасположении этих элементов.

Использование мультиспектрального (с несколькими флуорохромами) режима работы лазерного сканирующего конфокального микроскопа позволяет исследовать колоколизацию (пространственное взаиморасположение) в клетке двух или более разных веществ, например, белков, помеченных разными флуоресцентными красителями. Исследуя такие препараты в обычном флуоресцентном микроскопе, нельзя с уверенностью утверждать, находятся эти вещества рядом или одно под другим. С помощью метода оптических срезов и дальнейшей 3D-реконструкции объекта можно воссоздать объемное распределение веществ. Мультиспектральный режим так же позволяет проводить на конфокальном микроскопе исследования методом FISH.

Возможность получать временные серии изображений с высоким пространственным разрешением позволяет исследовать изменения, происходящие в клетках и их структурах во времени (4D реконструкция). Кроме того, благодаря наличию лазеров и системы сканирования можно осуществлять не только регистрацию временных изменений, но и осуществлять воздействие на клеточные структуры лазерным излучением с одновременным наблюдением протекающих процессов.

Новые методы лазерной сканирующей конфокальной микроскопии получили широкое распространение в фундаментальных науках, а также все шире применяются в практических исследованиях и диагностической медицине.

Методы конфокальной микроскопии позволяют выявить способность веществ накапливаться в цитоплазме, ядре или других структурах клетки, зарегистрировать образование метаболитов, измерить кинетику накопления и метаболизма веществ в клетке, скорость выведения веществ из клетки, сравнить интенсивность метаболизма в различных клеточных линиях и в различных условиях. Эти методы все шире применяются в исследованиях механизмов действия как канцерогенов, так и лекарственных препаратов и противоопухолевых соединений, позволяют рассчитывать их эффективные концентрации.

Анализ интенсивности и формы спектров собственной флуоресценции позволяет распознавать нормальные и воспаленные клетки, и такой метод, в частности, предложен в качестве нового способа ранней диагностики шейки матки.

Подобрав комбинацию фильтров для нескольких типов собственной флуоресценции, возможно без проведения гистохимического окрашивания и трудоемкого получения и исследования множества срезов различать злокачественные и нормальные тканевые структуры в биопсийных пробах лимфоузлов пациентов с лимфоаденопатией различного происхождения.

Методы конфокальной микроскопии широко применяются в эмбриологии и гидробиологии, ботанике, зоологии при изучении структуры гамет, развития и формирования организмов.

А1 — гибкая, полностью автоматизированная конфокальная система формирования изображений.

A1R — конфокальная система с гибридным сканером обеспечивает сверхбыструю регистрацию изображения с высоким разрешением.

Высокоэффективный спектральный детектор регистрирует сигнал флуоресценции при одновременном возбуждении нескольких длин волн;одновременное возбуждение 4 лазерами;получение изображения 32 каналами (512×32 пикселей) со скоростью 24 кадра/сек;точное спектральное разделение в режиме реального времени;функция V-фильтрации регулирует чувствительность каждого из 4-спектральных диапазонов, благодаря чему можно изготавливать настраиваемые фильтры, оптимальные для различных флуоресцентных красителей;гибридный сканер, способный регистрировать изображение со скоростью 420 кадров/сек (512×32 пикселей), позволяет одновременно проводить фотоактивацию (модель A1R);регистрация изображения с высоким разрешением — до 4096×4096 пикселей;благодаря VAAS (системе мнимой адаптируемой диафрагмы) засветка устраняется, а яркость изображения сохраняется; различные срезы можно соединить в единое изображение после захвата;дихроичное зеркало, увеличивающее эффективность флуоресценции на 30%, обеспечивает высокое качество изображения.

Развитие генной инженерии, протеомики, биотехнологии, современной фармацевтики и биомедицины способствовало быстрому внедрению новых методов конфокальной микроскопии, и в настоящее время они широко используются в клеточной биологии.

Конфокальную флуоресцентную микроскопию можно рассматривать как разновидность традиционной флуоресцентной микроскопии, которая позволяет исследовать внутреннюю микроструктуру клеток, причем не только фиксированных, но и живых, идентифицировать микроорганизмы, структуры клетки и отдельные молекулы, наблюдать динамические процессы в клетках. Конфокальная флуоресцентная микроскопия в дополнение к этому обеспечила возможность трехмерного субмикронного разрешения объекта и существенно расширила возможность неразрушающего анализа прозрачных образцов. Повышение разрешающей способности достигается благодаря использованию в конфокальных микроскопах лазеров в качестве источников света и конфокальной диафрагмы для фильтрации внефокусной флуоресценции. Преимущество лазеров по сравнению с ртутными или ксеноновыми лампами заключается в монохроматичности и высокой параллельности испускаемого пучка света. Эти свойства лазерного излучения обеспечивают более эффективную работу оптической системы микроскопа, уменьшают число бликов, улучшают точность фокусировки пучка света. На образце лазер освещает не все поле зрения, как в ламповом флуоресцентном микроскопе, а фокусируется в точку. Конечно, при этом лазерный луч возбуждает флуоресценцию как в точке фокуса, так и во всех слоях образца, через которые проходит. И если эта внефокусная флуоресценция, излучаемая слоями, расположенными выше и ниже фокальной плоскости, регистрируется вместе с основным сигналом из фокуса объектива, это ухудшает разрешение оптической системы. Избавиться от внефокусной флуоресценции позволяет конфокальная диафрагма. Изменяя диаметр конфокальной диафрагмы, можно определять толщину оптического слоя вблизи фокуса лазерного луча, поэтому флуоресценция, испускаемая выше и ниже фокуса, оказывается дефокусированной на конфокальной диафрагме и не регистрируется. Благодаря этому конфокальная микроскопия обеспечивает улучшенное разрешение, в первую очередь вдоль оси Z.

Современная конфокальная микроскопия позволяет решать три основные задачи: изучение тонкой структуры клетки, колоколизации (пространственного взаиморасположения) в клетке двух или более веществ, а так же исследование динамических процессов, протекающих в живых клетках.

Благодаря улучшенному разрешению, особенно повышенному разрешению по оси Z, и возможности создавать серии «оптических» срезов, конфокальный микроскоп позволяет исследовать тонкую структуру объекта в трехмерном пространстве. Специальные программы позволяют создать из серии оптических срезов объемное изображение объекта (3D) и как бы рассматривать его под разными углами зрения, что может дать ценную информацию о форме клеток, цитоскелете, структуре ядра, хромосомах и даже локализации в них отдельных генов, а так же о взаиморасположении этих элементов.

Использование мультиспектрального (с несколькими флуорохромами) режима работы лазерного сканирующего конфокального микроскопа позволяет исследовать колоколизацию (пространственное взаиморасположение) в клетке двух или более разных веществ, например, белков, помеченных разными флуоресцентными красителями. Исследуя такие препараты в обычном флуоресцентном микроскопе, нельзя с уверенностью утверждать, находятся эти вещества рядом или одно под другим. С помощью метода оптических срезов и дальнейшей 3D-реконструкции объекта можно воссоздать объемное распределение веществ. Мультиспектральный режим так же позволяет проводить на конфокальном микроскопе исследования методом FISH.

Возможность получать временные серии изображений с высоким пространственным разрешением позволяет исследовать изменения, происходящие в клетках и их структурах во времени (4D реконструкция). Кроме того, благодаря наличию лазеров и системы сканирования можно осуществлять не только регистрацию временных изменений, но и осуществлять воздействие на клеточные структуры лазерным излучением с одновременным наблюдением протекающих процессов.

Новые методы лазерной сканирующей конфокальной микроскопии получили широкое распространение в фундаментальных науках, а также все шире применяются в практических исследованиях и диагностической медицине.

Методы конфокальной микроскопии позволяют выявить способность веществ накапливаться в цитоплазме, ядре или других структурах клетки, зарегистрировать образование метаболитов, измерить кинетику накопления и метаболизма веществ в клетке, скорость выведения веществ из клетки, сравнить интенсивность метаболизма в различных клеточных линиях и в различных условиях. Эти методы все шире применяются в исследованиях механизмов действия как канцерогенов, так и лекарственных препаратов и противоопухолевых соединений, позволяют рассчитывать их эффективные концентрации.

Анализ интенсивности и формы спектров собственной флуоресценции позволяет распознавать нормальные и воспаленные клетки, и такой метод, в частности, предложен в качестве нового способа ранней диагностики шейки матки.

Подобрав комбинацию фильтров для нескольких типов собственной флуоресценции, возможно без проведения гистохимического окрашивания и трудоемкого получения и исследования множества срезов различать злокачественные и нормальные тканевые структуры в биопсийных пробах лимфоузлов пациентов с лимфоаденопатией различного происхождения.

Методы конфокальной микроскопии широко применяются в эмбриологии и гидробиологии, ботанике, зоологии при изучении структуры гамет, развития и формирования организмов.

Новая конфокальная система, обладающая мощными функциональными особенностями и значительно расширенными спектральными характеристиками.

Стабильность аппаратного и программного обеспечения и оптические данные обеспечивают высокое качество изображения;гибкость и модульность конструкции;версия 4.0 ПО NIS-Elements обеспечивает увеличенную точность и чувствительность в захвате изображения;спектры в широком диапазоне 320 нм регистрируются после одного сканирования;32 канала спектрального отображения с высокой точностью и чувствительностью;спектральное разрешение, нм — 2,5, 5, или 10;разделение спектральных изображений без взаимного влияния;одновременная 4-канальная регистрация изображения: 3-канальная регистрация конфокального изображения + ДИК.

Технические характеристики:

лазерный модуль — для 3 или 4 лазеров с акустооптической модуляцией, широкий выбор лазеров в диапазоне 400 нм — 647 нм;детекторы:v пропускание, нм — 400-750;v стандартный (3 флуоресцентных канала);v детектор проходящего света;v спектральный детектор (32 канала, разрешение спектров 2,5 нм/5 нм/ 10 нм);конфокальная диафрагма — круглой формы, 6 размеров;сканер:v разрешение, пкс — 2048×2048;v скорости сканирования до 100 кадров/сек (512×32) и 8 кадров/сек (512×512, двунаправленно);v трансфокация — 1-1000х;приложения — 3-х мерная реконструкция, исследования во времени, колокализационный анализ, спектральный анализ, деконволюция, FRAP, FRET, FLIP, фотоактивация, автоматическая сшивка изображений и сканирования областей интереса.

Развитие генной инженерии, протеомики, биотехнологии, современной фармацевтики и биомедицины способствовало быстрому внедрению новых методов конфокальной микроскопии, и в настоящее время они широко используются в клеточной биологии.

Конфокальную флуоресцентную микроскопию можно рассматривать как разновидность традиционной флуоресцентной микроскопии, которая позволяет исследовать внутреннюю микроструктуру клеток, причем не только фиксированных, но и живых, идентифицировать микроорганизмы, структуры клетки и отдельные молекулы, наблюдать динамические процессы в клетках. Конфокальная флуоресцентная микроскопия в дополнение к этому обеспечила возможность трехмерного субмикронного разрешения объекта и существенно расширила возможность неразрушающего анализа прозрачных образцов. Повышение разрешающей способности достигается благодаря использованию в конфокальных микроскопах лазеров в качестве источников света и конфокальной диафрагмы для фильтрации внефокусной флуоресценции. Преимущество лазеров по сравнению с ртутными или ксеноновыми лампами заключается в монохроматичности и высокой параллельности испускаемого пучка света. Эти свойства лазерного излучения обеспечивают более эффективную работу оптической системы микроскопа, уменьшают число бликов, улучшают точность фокусировки пучка света. На образце лазер освещает не все поле зрения, как в ламповом флуоресцентном микроскопе, а фокусируется в точку. Конечно, при этом лазерный луч возбуждает флуоресценцию как в точке фокуса, так и во всех слоях образца, через которые проходит. И если эта внефокусная флуоресценция, излучаемая слоями, расположенными выше и ниже фокальной плоскости, регистрируется вместе с основным сигналом из фокуса объектива, это ухудшает разрешение оптической системы. Избавиться от внефокусной флуоресценции позволяет конфокальная диафрагма. Изменяя диаметр конфокальной диафрагмы, можно определять толщину оптического слоя вблизи фокуса лазерного луча, поэтому флуоресценция, испускаемая выше и ниже фокуса, оказывается дефокусированной на конфокальной диафрагме и не регистрируется. Благодаря этому конфокальная микроскопия обеспечивает улучшенное разрешение, в первую очередь вдоль оси Z.

Современная конфокальная микроскопия позволяет решать три основные задачи: изучение тонкой структуры клетки, колоколизации (пространственного взаиморасположения) в клетке двух или более веществ, а так же исследование динамических процессов, протекающих в живых клетках.

Благодаря улучшенному разрешению, особенно повышенному разрешению по оси Z, и возможности создавать серии «оптических» срезов, конфокальный микроскоп позволяет исследовать тонкую структуру объекта в трехмерном пространстве. Специальные программы позволяют создать из серии оптических срезов объемное изображение объекта (3D) и как бы рассматривать его под разными углами зрения, что может дать ценную информацию о форме клеток, цитоскелете, структуре ядра, хромосомах и даже локализации в них отдельных генов, а так же о взаиморасположении этих элементов.

Использование мультиспектрального (с несколькими флуорохромами) режима работы лазерного сканирующего конфокального микроскопа позволяет исследовать колоколизацию (пространственное взаиморасположение) в клетке двух или более разных веществ, например, белков, помеченных разными флуоресцентными красителями. Исследуя такие препараты в обычном флуоресцентном микроскопе, нельзя с уверенностью утверждать, находятся эти вещества рядом или одно под другим. С помощью метода оптических срезов и дальнейшей 3D-реконструкции объекта можно воссоздать объемное распределение веществ. Мультиспектральный режим так же позволяет проводить на конфокальном микроскопе исследования методом FISH.

Возможность получать временные серии изображений с высоким пространственным разрешением позволяет исследовать изменения, происходящие в клетках и их структурах во времени (4D реконструкция). Кроме того, благодаря наличию лазеров и системы сканирования можно осуществлять не только регистрацию временных изменений, но и осуществлять воздействие на клеточные структуры лазерным излучением с одновременным наблюдением протекающих процессов.

Новые методы лазерной сканирующей конфокальной микроскопии получили широкое распространение в фундаментальных науках, а также все шире применяются в практических исследованиях и диагностической медицине.

Методы конфокальной микроскопии позволяют выявить способность веществ накапливаться в цитоплазме, ядре или других структурах клетки, зарегистрировать образование метаболитов, измерить кинетику накопления и метаболизма веществ в клетке, скорость выведения веществ из клетки, сравнить интенсивность метаболизма в различных клеточных линиях и в различных условиях. Эти методы все шире применяются в исследованиях механизмов действия как канцерогенов, так и лекарственных препаратов и противоопухолевых соединений, позволяют рассчитывать их эффективные концентрации.

Анализ интенсивности и формы спектров собственной флуоресценции позволяет распознавать нормальные и воспаленные клетки, и такой метод, в частности, предложен в качестве нового способа ранней диагностики шейки матки.

Подобрав комбинацию фильтров для нескольких типов собственной флуоресценции, возможно без проведения гистохимического окрашивания и трудоемкого получения и исследования множества срезов различать злокачественные и нормальные тканевые структуры в биопсийных пробах лимфоузлов пациентов с лимфоаденопатией различного происхождения.

Методы конфокальной микроскопии широко применяются в эмбриологии и гидробиологии, ботанике, зоологии при изучении структуры гамет, развития и формирования организмов.

Eclipse LV100Pol — микроскоп для исследований в свете поляризации, предназначенный для исследовательских задач.

Модель оснащена галогенной лампой высокой интенсивности, которая обеспечивает большую яркость изображений, низкое энергопотребление и меньший нагрев системы.

Ход фокусировки увеличен до 30 мм, что облегчает наблюдение высокорельефных образцов;5-гнездный револьвер с механизмом обратной центровки и пазом для компенсатора DIN позволяет размещать различные компенсаторы для сложных количественных измерений;линза Бертрана позволяет осуществлять наблюдение и документирование коноскопических и ортоскопических изображений;прецизионный съемный анализатор расположен непосредственно в промежуточном тубусе и может поворачиваться на 360°;возможность работать в проходящем и в отраженном свете;прецизионный поворотный предметный столик отличается большими размерами, возможностью предварительной центровки и механизмом блокировки;окуляры — 10х/22;окулярный тубус — бинокулярный, тринокулярный;анализатор — вращающийся на 360°; минимальный шаг 0,1°;предметный столик — круглый, вращаемый в горизонтальной плоскости; прикрепляемый механический;осветитель проходящего света -галогеновый, 50 Вт; встроенная оптика «Fly-eye» — для цифровой микроскопии; доп. осветитель 12 В — 100 Вт;эпископический осветитель — галогеновый 50 Вт со встроенным трансформатором;объективы — CFI P Achromat 4х, 10х, 20х, 40х, 100х Oil; CFI LU Plan Fluor Epi P 5х,10х, 20х, 50х, 100х.