Принцип действия системы QX100: Система QX100 Droplet Digital PCR предназначена для проведения капельной цифровой ПЦР, позволяющей добиться высочайшей точности и достоверности результатов. Система состоит из QX100 droplet генератора и QX100 droplet ридера. Капельная цифровая ПЦР осуществляется в четыре последовательных этапа:Подготавливают 20 мкл реакционной ПЦР смеси для каждого образца, затем смесь помещают в пластиковый картридж QX100 droplet генератора. В соответствующие каналы картриджа заливается специальное минеральное масло, и наполненный картридж устанавливают в QX100 droplet генератор, где образцы и масло соединяются между собой по микро каналам внутри картриджа для получения эмульсии — около 20 000 монодисперсных капель для каждого из 8 подготовленных образцов. Объем каждой капли 1 nL. Эмульсионные образцы переносятся на стандартную 96-луночную плашку для ПЦР и амплифицируются с помощью стандартного термоциклера, например C1000 touch. После завершения ПЦР плашка загружается в QX100 droplet ридер, который обеспечивает анализ флуоресцентного сигнала капель, детектируя каждую каплю по очереди и определяя, какие капли содержат мишень, а какие нет. Анализ результатов осуществляется с помощью программного обеспечения ddPCR. Применение: Система QX100 для проведения капельной цифровой ПЦР позволяет получить точные количественные результаты, и может быть использована в лабораторной диагностике.Высокоточное определение количества копий гена (CNV): капельный цифровой ПЦР позволяет определить CNV с точностью соотношения 1.2х. Определение редких последовательностей ДНК: капельный цифровой ПЦР позволяет определить редкие мутации или выявить наличие опухолевых клеток в очень небольшом титре. Исследование одной клетки: возможность изучения вариабельности генной экспрессии от клетки к клетке. Экспрессия генов и miRNA анализ: капельный цифровой ПЦР позволяет количественно определить уровень экспрессии гена, особенно при низких концентрациях miRNAs с более высокой точностью и чувствительностью. Преимущества цифрового капельного ПЦР по сравнению с РТ ПЦР:исключительная чувствительность (до одной капли) количественного определения копий ДНК-мишени; исключительная точность (± 10%) определения разницы уровня генной экспрессии; отсутствие необходимости использования калибровочных кривых; прямое обнаружение редкого варианта мишени в сложном окружении. Значительно более высокая чувствительность по сравнению с другими методами.