Щелочная фосфатаза катализирует отщепление 5’- и 3’-фосфатных групп от ДНК, РНК и нуклеотидов, а также от белков.
Термочувствительная фосфатаза FastAp активна во всех рестриктазных и ПЦР-буферах. Она дефосфорилирует все типы концов ДНК (липкие и тупые) в течение 10 минут при +37оС и инактивируется при +75оС в течение 5 минут, поэтому не требуется очистка реакционной смеси перед лигированием.
Особенности щелочной фосфатазы FastAp:
Рекомбинантный белок;быстрое дефосфорилирование - 10 минут;быстрая инактивация - 5 минут;можно использовать для одновременного расщепления и дефосфорилирования векторной ДНК;активна во всех рестриктазных и ПЦР-буферах;дефосфорилирует белки;используется для очистки ПЦР-смесей совместно с ExoI.
Области применения:
Дефосфорилирование векторной ДНК при клонировании;очистка ПЦР-продуктов из реакционных смесей перед секвенированием;дефосфорилировнание 5’-концов ДНК перед мечением полинуклеотидкиназой Т4;другие экперименты, связанные с дефосфорилированием нуклеиновых кислот;дефосфорилирование белков.
Важно!
Связывание фосфатазы с ДНК може приводить к смещению полос в агарозном геле. Во избежание подобного смещения рекомендуется добавлять к электрофорезным образцам буфер для нанесения с SDS и инкубировать образцы в течение 10 минут при +65оС, а затем охладить во льду.
Условия хранения: -20оС
