СинонимыBSA Физические данныеПорошок Происхождениеиз сывороточного альбумин Mолекулярная массаприбл. 68000 г/моль CAS-No.:9048-46-8 HS-No.:35029070 EC-No.:232-936-2 Условия хранения:2-8°C LGK:10 - 13 WGK:1 Остаток основного вещества (Белка)мин. 98 % pH (2 %; H2O; 20°C)6.6 - 7.5 Тяжелые металлымакс. 0.001 % Остаток при прокаливании (сульфатов)макс. 3 % Потеря при сушке (105°C; 4 ч)макс. 3 % Жирмакс. 1.0 % Бычий сывороточный альбумин (BSA) добавляют в качестве стабилизирующего компонента для белков / ферментов в несколько ферментных реакций и буферов для хранения. Концентрация обычно составляет от 0,01% (0,1 мг / мл, например, от 2 до 3% (30 мг / мл, например, 1, 2). BSA добавляют к 10X концентрированным буферам модифицирующих ДНК ферментов или рестрикционных ферментов в концентрации 0,5 мг / мл (см., Например, 6, 8). Альтернативно, BSA может быть замещен желатином для таких целей при той же концентрации. Кроме того, альбумин применяют в качестве блокирующего агента для блокирования несвязанных поверхностей блоттинговых мембран в иммуноблотах (3%, ссылка 1, 2, 7) или ELISA (3% в PBS, ссылка 2) или для разведения антисывороток и антител -блочные решения, соответственно. В ELISA BSA часто заменяют обезжиренным молоком (A0830). В качестве стандарта для определения белка см. 9. Эта фракция альбумина была произведена комбинацией метода теплового шока и осаждения спиртами. Альбумин стабилен в виде порошка (3 года) или в растворе (биологические буферы, такие как PBS, один год при температуре от + 4 ° C до -20 ° C). Запасовые растворы готовят в концентрациях до 20%. Если кристаллы образуются при хранении растворов, их можно повторно растворить путем нагревания до 37 ° С и перемешивания. Обычно азид натрия добавляют при конечной концентрации 2 мМ (или 0,02-0,2%) для предотвращения микробных загрязнений. Цитируемая литература: (1) Taylor, J.A. et al. (1995) Mol. Cell. Biol. 15, 4149-4157 Application: Blocking of free surfaces of immuno blots. (2) Reinhard, M. et al. (1995) EMBO J.14, 1583-1589 Application: Blocking of free surfaces of immuno blots. (3) O'Neill, S.D. & Spanswick, R.M. (1984) J. Membrane Biol..79, 231-2439 Stabilization of proteins during homogenization of plant tissue. (4) Fazekas de St. Groth, S. et al. (1963) Biochim. Biophys. Acta71, 377-391 Standard for calibration curves for the determination of the protein concentration. (5) Peters, T.A. & Sjöholm, I. eds. (1977) Albumin: Structure, Biosynthesis, Function. FEBS 11th Meeting Copenhagen 1977 Vol. 50 Colloquium B9 [Pergamon Press]. (6) Cobianchi, F. & Wilson, S.H. (1987) Methods Enzymol. 152, 94-110. Enzyme for the modification and labeling of DNA and RNA. (7) Harlow. E. & Lane, D. eds. (1988) Antibodies: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbour (Seite 496+684). (8) Ausubel, F.A., Brent, R., Kingston, R.E., Moore, D.D., Seidman, J.G., Smith, J.A. & Struhl, K. eds. (2001)Current Protocols in Molecular Biology. Supplement 21, Page 3.4.2, Greene Publishing & Wiley-Interscience, New York. (9) Bradford, M.M. (1976) Anal. Biochem. 72, 248-254 Quantification of protein concentration in microgram-quantities.