Набор PLD используется для выделения плазмидной ДНК из 3-5 мл бактериальной культуры; принцип работы - связывание ДНК с сорбентом на колонках; набор позволяет выделять до 25 мкг ДНК, пригодной для любых молекулярно-биологических реакций (ПЦР, секвенирование, лигирование и т.д.) со спектральными характеристиками качества А (260/280) = 1,8 – 2,0; время выделения - 15 мин; условия хранения - при комнатной температуре (раствор РНКазы А - при -20 оС); срок годности - до 12 месяцев. В состав набора входит: буфер R - 12 мл; буфер L - 12 мл; буфер N - 12 мл; буфер W - 8 мл; буфер E - 5 мл; РНКаза А - 120 мкл; микроколонки - 50 шт; пробирки объемом 2 мл - 50 шт. Принцип действия Наборы на основе колонок БиоСилика применяются для выделения плазмид из бактериальных культур, очистки ДНК после ферментативных реакций (ПЦР, рестрикция, дефосфорилирование, лигирование, кинирование, обратная транскрипция и др.) и для элюции фрагментов ДНК из агарозного геля. Очистка ДНК на колонках БиоСилика начинается с избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли, последующей отмывки связанной ДНК от примесей, и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК. Сорбент, изготовленный по запатентованной технологии, позволяет выделять до 25 мкг свободной от примесей ДНК. Растворы, входящие в состав наборов, обеспечивают высокий выход и чистоту конечного препарата ДНК. Эффективность сорбции ДНК зависит от значения pH. Связывание ДНК с сорбентом происходит при pH < 7,5, а элюция ДНК - при pH > 7,5. Отмывка ДНК, связанной с колонкой, происходит в присутствии 80% этанола. Элюция ДНК проводится буфером, содержащим 10 мМ Трис, рН = 8,5. Оптимальный объем элюции - 50 мкл. Элюция меньшим объемом (не рекомендуется элюировать менее, чем 30 мкл) повышает концентрацию ДНК в конечном препарате, вместе с тем увеличиваются потери (выход 60 - 70%).